马铃薯高效栽培技术-第16部分
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，并将酸碱度调到pH值5。7～5。8。根据需要做成固体培养基或液体培养基（不加琼脂），装在试管中或三角瓶、罐头瓶中，高压灭菌后放在无菌室内备用。
第四步，进行茎尖组织剥离和接种。在经过高温处理和催芽的块茎上取3～4厘米长的幼芽若干个，经多次自来水冲洗和多道消毒后，在无菌室内的超净工作台上的40倍的解剖镜下进行茎尖剥离，用解剖针剥去茎尖上边包着的幼叶，露出茎尖组织，切取带1～2个叶原基的茎尖组织，大小在0。1～0。3毫米之间。随之把茎尖组织接种到事先准备好的装有培养基的试管中，每一个试管一个茎尖。还有一种方法是把经过消毒的薯芽，直接插入培养基中，生根长成苗后，再做剥离，成活率高，效果好。
第五步，组织培养。把带有茎尖组织的试管，放在温度保持在20℃～25℃的培养室的培养架上，光照要达到2000～3000勒，每天照16小时以上。经30～40天，成活的茎尖，颜色发绿，茎明显的伸长，叶原基长成小叶。之后，再将其转接到生根培养基中培养，再经3～4个月长成有根系的3～4个叶片的小单株，叫“茎尖苗”。然后按节切成段，进行扩繁，分植于3～4个三角瓶中（编号，如1…1、1…2、1…3等）培养1个月，又长成新的“茎尖苗”，待下一步进行病毒检测。
第六步，进行病毒检测，做出鉴定。检测方法多采用酶联免疫吸附法（ELISA），检测花叶病毒、重花叶病毒和卷叶病毒。用反复聚丙烯酰胺凝胶电泳方法来检测类病毒。检测时同一编号取1瓶检测，根据检测结果，如果各种病毒都为0的，就是脱毒成功的，相同编号的苗子留下继续剪段扩繁，此苗正式称为“脱毒苗”。而仍带有病毒的苗则为失败者，要把相同编号的苗子全部淘汰掉。
第七步，进行脱毒苗快繁。经检测鉴定的的脱毒苗，切段繁成健壮的基础苗，当长到6～8片叶时，再切成4～5段，扦插在MS固体培养基或液体培养基中。在夜间15℃、白天25℃、光照强度3000勒、照射16小时、夜间不见光8小时的条件下，培养20～25天，苗子长大，再进行第二次剪段扩繁，这样每20～25天扩大4～5倍。扩繁过程中还要检测，汰除带毒株系的苗子。按生产计划，扩繁达到一定数量，为下一步生产原原种和微型种薯做好准备。
基础苗除扩繁外，还要保留部分基础苗，为下茬生产扩繁使用。基础苗使用2年左右应重新进行剥离，进行更新，以保持质量。
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（二）微型脱毒种薯和常规脱毒原原种的生产（）
1。微型脱毒种薯生产
在温室或防虫网棚中，采用无土栽培技术，把培养的脱毒苗，扦插在用蛭石或细沙珍珠岩等做基质的苗床或育苗盘上，苗期和结薯期分别喷撒促进长苗、扎根和促进结薯的营养液，也根据需要喷些清水，人工控制光、温、水、肥、气等生长条件。扦插密度一般为3厘米×3厘米，或3厘米×4厘米，每平方米插脱毒苗830～1100株。脱毒苗在基质里生长60天左右即可收获一茬，每平方米可收1000～1500粒重量在1～10克的微型脱毒种薯。由于在防护的条件下，加上不断喷洒防虫药剂，杜绝了传毒媒介传毒，加之基质的更换，所以微型脱毒种薯质量最好，既无病毒，又没有真菌和细菌病害，属顶级脱毒原原种。微型脱毒种薯由于体积小，重量轻，贮存和运输都极为方便。微型种薯虽然个小，但它的生物学特征完全与同品种的大个种薯相同，而且生产能力很强。只要打破休眠期，在适宜条件下，发芽率在95％以上。
脱毒微型种薯生产，由于采取了快繁技术，便于实行规范化、工厂化生产，可生产出大量原原种，比常规原原种生产繁殖系数大大提高，可以加快脱毒种薯推广速度，并提高脱毒种薯的质量水平，所以在国内发展很迅速。目前，还有许多地方试用水培、雾培等方法，进行脱毒微型种薯生产，有的已建成生产线正式生产。
2。常规脱毒原原种生产
在气温相对较低的地方，建造防虫网室，网室内的土地要进行精细整理。把经过室外温度锻炼的脱毒苗移栽到土壤中，每667米2
植苗6000株左右，缓苗后按正常肥、水管理，每隔7天打杀虫剂一次。在薯苗生长过程中，分别在苗期、花期、成熟期进行田间去杂、去劣、去病株，这样生产出的脱毒种薯（相对微型脱毒种薯个头大，在50克以上）称为常规原原种，按代数算为0代（或称当代）。可作为下一代脱毒种薯繁殖材料，或直接作生产田种薯（图15）。
图15 马铃薯茎尖脱毒苗、微型薯、原原种生产程序示意图
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（三）其他各级脱毒种薯的生产（）
经过无菌室、培养室、温室、网棚等保护设施及生物技术，无土栽培或有土栽培等技术措施，得到的脱毒原原种（包括脱毒微型种薯），已是主要病毒和真菌、细菌病毒都为0的健康基础种薯。下一步需要扩大数量，在开放的农田中进行继代扩繁。在扩繁过程中，还应采取有效措施，防止病毒的再侵染，不然就保证不了所繁脱毒种薯的级别质量。
主要措施是繁种田必须与毒源作物有一定的隔离条件，尽量不让传毒媒介飞入繁种田。这就需要认真选择繁种地块，首先是选高海拔、高纬度、低温度、风速大、蚜虫叶蝉等刺吸式口器害虫少的地方，最好有自然隔离条件的草原、林地之间、环山地段等不重茬的地块。在马铃薯集中种植区也要与未脱毒的马铃薯及茄科、十字花科作物、烟草等有500米的距离。如果距离低于500米，应在隔离带中种50米以上的麦类等作物，使蚜虫等飞来时不直接进入繁种田。再就是出苗后，用黄板测蚜虫，即用30厘米×20厘米的纸板，一面涂满黄色广告色，上面再涂一层黄油，钉在1米高的棍子上，插在地边若干个，利用蚜虫趋黄性吸引蚜虫，每天检查，如发现黄板上出现蚜虫，说明已有蚜虫迁飞到繁种田，这时就开始在田间喷洒杀虫药剂，每隔7天喷一次，直到杀秧之前停止。同时要喷洒杀灭真菌、细菌等病害的农药8～10次。收获前10天要用药剂或机械杀秧，以减少病毒进入薯块。
1。脱毒原种生产
按上述条件选地，用脱毒微型种薯或常规脱毒原原种作繁种材料，生长季节认真施药灭虫杀菌，并严格去杂去劣去病株，生产出来的块茎，叫做脱毒原种，按代数算为一代（G1
）。脱毒原种可以作为下一级繁种材料或直接用在生产田种植。
2。脱毒一级种薯生产
按既定条件安排繁种地，生长季节认真落实施药计划，严格去杂去劣去病株，用原种作繁种材料，生产出来的块茎，叫做脱毒一级种薯，按代数算为二代（G2
）。脱毒一级种薯可以作为繁种材料繁下一级种薯，也可作为生产田用种。
3。脱毒二种薯生产
仍应照上述选地条件和技术措施，用脱毒一级种薯作繁种材料进行种薯生产，生产出来的块茎，叫做脱毒二级种薯，按代数算为三代（G3
），脱毒二级种直接用于大田进行商品薯生产。脱毒二级种生产出的块茎，只能用作商品薯，已出了脱毒薯的范围，不再称为脱毒薯，不能再作种薯使用。
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（四）脱毒种薯繁育体系新概念（）
我国著名马铃薯专家屈冬玉、谢开云博士等在2007年发表的《大力推进三代种薯繁育体系建设，提高中国马铃薯种薯质量和生产水平》的论文中，提出了实行“三代种薯繁育体系概念”，主要针对全世界及全中国，种薯分级都处于混乱状态，且种薯质量高低不一的情况，建议全面采用三代种薯体系（G1
—G2
—G3
），即从微型薯生产（G1
种薯）开始，将微型薯生产得到的G2
代种薯再种一年，得到G3
代种薯，将G3
代种薯用于大田商品马铃薯生产。
1。一代种薯（G
1
）
是指在人工隔离条件下（温室、网室或实验室）用脱毒苗生产出的微型种薯（重量在1克以上，20克以下），再次种植时不需要进行切块。可以是利用组培苗（试管苗）在无病害基质（蛭石、草炭、珍珠岩、细沙等）中得到的微型种薯，也可以是利用组培苗（试管苗）在无基质条件（水培或雾培）下得到的微型种薯，还可以是组培苗直接移栽到人工隔离条件下生产的小块茎。无论哪种方式生产出来的微型薯，都必须保证不带任何病害，即不带任何病毒、真菌和细菌病害。
2。二代种薯（G
2
）
是指在自然条件好（高海拔、蚜虫少、气候冷凉）、天然隔离条件好、周边800米内无其他级别种薯或商品薯种植等条件下，利用原原种（G1
）做种薯生产出来的种薯，块茎大小在75克以下。不带各种真、细菌病害，田间病毒（PLRV、PVX、PVY、PVS）株率不超过1％的种薯。
3。三代种薯（G
3
）
在自然条件好（海拔较高、蚜虫较少、气候较冷凉）、天然隔离条件较好、周边800米内无商品薯种植等条件下，利用原种（G2
种薯）做种薯生产出来的、块茎大小在50～100克的种薯。不带各种真、细菌病害、田间病毒（PLRV、PVX、PVY、PVS）株率不超过5％。
此繁育体系无论在我国南方或北方，都以种植次数来计算种薯级别。因为减少了继代扩繁次数，相当于以前提出的脱毒种薯早代利用，将原来种薯生产周期从5年缩短到3年，这就大大保证了种薯质量，为马铃薯生产水平的提高打下了基础。
这一建议已提交农业部，待农业部制定出新的种薯繁育行业标准后，将在全国推行实施。同时，将建立三代全程质量控制体系。在种薯生产前申请、登记，生产过程中进行室内检测、田间检验等，最后根据检测、检验结果签发合格证书及销售标签。使我国脱毒种薯生产、经营、使用步入更加规范的轨道，可大大提高我国马铃薯产业生产水平。
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二、为什么马铃薯脱毒种薯能增产（）
实践证明，应用脱毒种薯增产十分显著，一般增产30％～60％，高的增产100％。为什么脱毒种薯能增产呢？
马铃薯退化所引起的马铃薯生长过程中的各种病症，如芽块刚刚发芽没等出苗就死掉、长出地面植株很矮小、细弱，叶片皱缩，或叶片出现黄绿相间的斑驳、叶脉坏死、叶片脱落、植株死亡、还有的叶片卷曲、发脆等，致使结的薯块少而且个小、严重减产。实际上是马铃薯植株感染了不同的病毒，破坏了植株内在的正常功能，叶片受到干扰不能正常进行光合作用、制造营养；输导组织受到破坏不能正常运送养分水分；根系受到影响，不能正常吸收水分和养分，总之植株的新陈代谢完全失常。即使满足其各种生长条件，植株也不能很好地生长，仍然避免不了严重减产的后果。
经过茎尖脱毒技术处理后，把种薯体内的病毒清理出去，使它从病态恢复到健康的水平，恢复了原品种的特性，植株健壮了，一切生理功能都达到了旺盛的状态，新陈代谢正常进行。其根系发达，吸收能力增强了，茎粗叶茂，叶片平展，色绿无斑，无黄叶无死秧。于是，马铃薯植株的生命力增强了，有机物制造的光合作用正常，无机营养和有机营养的上传下导没有障碍了，发挥出了最大的增产潜力，所以产量水平便达到了最佳状态。
在种植过程中怎样挖掘脱毒种薯内在的增产潜力，需要种植者认真研究并采取相应的技术措施，来满足其对营养面积、水、肥、光、热、气等外在条件的要求，以夺得更高的产量和更好的效益。
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三、怎样选用和购买脱毒种薯（）
早代脱毒种薯由于继代扩繁次数少，在田间生长时间相对短些，这样病毒病和真、细菌病害重新侵染的机会少，健康水平高，种性强，增产潜力更大，如脱毒原种薯和脱毒一级种；而晚代脱毒种薯，继代扩繁次数相对较多，切芽块次数也多，虽然采取切刀消毒和拌种防病、自然隔离和喷洒药剂杀虫等措施，可是仍然避免不了病毒及真、细菌病害的再侵染，如二级种薯和三级种薯。所以，早代种薯在田间种植后退化株率极低，即使发病，病情也非常轻，植株生长健壮，整齐一致，增产幅度大于晚代脱毒种薯。
另外，不同马铃薯品种对病毒的抗病力不同，有的品种脱毒后很快又被病毒侵染，有的品种脱毒后再侵染就比较慢，田间退化株率一直保持在很低的水平。据调查，克新1号脱毒后，继代扩繁到三级种，播种到大田，田间植株发病株率仅有0。786％。而集农958的脱毒三级种薯，其田间发病株率则为1。856％。费乌瑞它的二级种薯，田间发病率高达6。82％。从而可以看出不同品种抗退化的能力是不一样的。
鉴于上述情况，根据近年来我国马铃薯种植的整体技术水平的提升，选用脱毒马铃薯种薯时，一般应尽量选用早代种薯，特别是易感病毒的品种，更应考虑应用早代种薯；高投入现代化种植的喷灌圈也应选用增产大的早代种薯，使用原种或一级种薯为好，达到高投入高产出的效果；若以繁种为目的时则必须使用早代种薯，最好使用原原种或原种作种薯。一般农户的商品薯田，也应使用早代种薯作种，但必须加强管理，“以种促管”逐步提高管理水平和单产。
怎样购买脱毒种薯？ 目前，我国种薯市场较为混乱，虽然国家对种薯生产和种薯经营都有规定和具体办法，但仍有部分见利忘义的人，乘脱毒种薯知识不普及，有些种植者不懂脱毒种薯之机，把扩繁多代达到5代以上不属于脱毒种薯质量的商品薯当脱毒薯销售给用户，甚至把没脱过毒的商品薯拿来当脱毒种薯销售，以假乱真。国家规定，承担脱毒种薯生产的单位或个人，必须具有一定资质，并获得相应种子管
